Антистарение

...молодость - это надолго

  • Увеличить размер
  • Размер по умолчанию
  • Уменьшить размер
Главная | Тезисы докладов конференции им.В.В.Фролькиса | Конференция имени В.В.Фролькиса - 2013 | ВЛИЯНИЕ ОДНОКРАТНОГО РЕНТГЕНОВСКОГО ОБЛУЧЕНИЯ НА ЭПИГЕНОМ В ХОДЕ ОНТОГЕНЕЗА LINUM USITATISSIMUM

ВЛИЯНИЕ ОДНОКРАТНОГО РЕНТГЕНОВСКОГО ОБЛУЧЕНИЯ НА ЭПИГЕНОМ В ХОДЕ ОНТОГЕНЕЗА LINUM USITATISSIMUM

А.Н. Берестяная
Институт клеточной биологии и генетической инженерии НАН Украины;
ГУ «Институт геронтологии имени Д.Ф. Чеботарёва НАМН Украины», Киев

Процесс старения обусловлен комплексным взаимодействием генетического аппарата и повреждающих факторов различной природы. Эпигеном, как динамическая система контроля экспрессии генов, выступает связующим звеном в данном взаимодействии. Выяснение эпигенетической компоненты в механизмах регуляции старения и установление воздействия на эти процессы радиационного облучения является на сегодняшний день одним из актуальных вопросов биологии. Целью работы было исследование изменений эпигенома в ходе онтогенеза Linum usitatissimum, подверженного действию разных доз однократного рентгеновского облучения.
Материалы и методы. Семена Linum usitatissimum подвергались воздействию однократного рентгеновского облучения в 4 дозах: 10 Гр, 20 Гр, 50 Гр, 100 Гр. Растения выращивали в условиях вегетационного опыта. Объектом исследования была ДНК семядольных листьев. ДНК выделяли модифицированным СТАБ-методом. Исследовали эпигеном путем метилчувствительной ПЦР (МЧ-ПЦР). Каждый из образцов ДНК в количестве 1 мкг подвергали гидролизу в 20 мкл реакционной смеси, содержащей 10 ед. акт. метилчувствительной рестиктазы HpaII в реакционном буфере, при температуре 37 оС в течение 2 ч. Использовали 1 мкл реакционной смеси для последующей амплификации с соответствующими праймерами.
Результаты и обсуждение. Метод МЧ-ПЦР позволяет определять статус метилирования в динамике и прослеживать характер его изменения. В данной работе с помощью метода МЧ-ПЦР мы провели полногеномный анализ статуса метилирования CG-сайтов, а также скрининг метилирования в регуляторном участке гена 5S рРНК Linum usitatissimum. Учитывая, что задачей исследования было определение эпигенетических изменений в образцах, облученных дозами ионизирующего излучения в ходе онтогенеза, мы строили исследование таким образом, чтобы фиксировать параметры на разных стадиях онтогенеза семядольных листьев, условно обозначенных как: С1, С2, С3, С4, каждая из которых соответствует этапам морфологически и биохимически значимых изменений тканей.
В результате скрининга CG-сайтов в геноме и фрагменте гена 5S рРНК, мы установили наличие дозовой зависимости. С увеличением дозы облучения возникали дополнительные продукты реакции, что указывало на появление новых сайтов метилирования в облученных образцах. Именно эти продукты ПЦР и представляли главный предмет наших поисков. Предположительно, это эпигенетические маркеры однократного рентгеновского облучения, которое провоцирует дополнительное метилирование как реакцию защиты генов. В процессе старения листьев Linum usitatissimum наблюдалось снижение уровня метилирования CG-динуклеотидов генома, а также  уменьшение количества метилированных сайтов во фрагменте гена 5S рРНК в облученных образцах. Та картина дозовой зависимости повышения уровня метилирования, которую мы наблюдали на ранней стадии онтогенеза, нивелируется в процессе перехода к поздним стадиям.
Выводы. Скрининг сайтов метилирования с помощью МЧ-ПЦР показал дозозависимое увеличение метилированных последовательностей на начальных стадиях онтогенеза, и уменьшение метилированных сайтов на поздних этапах онтогенеза, вследствие возрастного гипометилирования генома.

 

Опрос

Какова роль низкомолекулярных (небелковых) антиоксидантов в организме?
 
Сейчас на сайте находятся:
 43 гостей 

Самое популярное



ВАЛЕОЦЕНТР имени Н.А. Бобрышева ГЕНЕТИЧЕСКАЯ И РЕГЕНЕРАТИВНАЯ МЕДИЦИНА: ПРОБЛЕМЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ Применение омега-3 полиненасыщенных жирных кислот в медицине V НАЦИОНАЛЬНЫЙ КОНГРЕСС ГЕРОНТОЛОГОВ И ГЕРИАТРОВ УКРАИНЫ - ПРОГРАММА Омега-3-ненасыщенные жирные кислоты Онтогенетические часы. Гипотеза Элевационная теория старения Менопауза та її наслідки Проблемы гипобиоза и продления жизни Новые технологии в регенеративной медицине: мировой опыт клинического применения стволовых клеток список участников октябрьского конгресса Жанна Луиза Кальман Основные теории старения Институт геронтологии НАМНУ Теории старения Конференция им.В.В.Фролькиса Препараты против старения Болезнь Альцгеймера Болезнь Паркинсона Онкопатология Возрастзависимая патология Остеопороз Конференции по старению и омоложению Ресвератрол Semagacestat Омега-3-ненасыщенные жирные кислоты Способы омоложения и достижения долголетия Методы исследований в геронтологии Жанна Луиза Кальман Функциональные диеты для омоложения

Последние публикации

рулонные шторы Jaluzi-Service.com.ua
Введите логин для входа


Главная | Тезисы докладов конференции им.В.В.Фролькиса | Конференция имени В.В.Фролькиса - 2013 | ВЛИЯНИЕ ОДНОКРАТНОГО РЕНТГЕНОВСКОГО ОБЛУЧЕНИЯ НА ЭПИГЕНОМ В ХОДЕ ОНТОГЕНЕЗА LINUM USITATISSIMUM